Ezio, zoon van een voorname familie uit Florence, ontdekt een manuscript dat hem de namen onthult van machtige en corrupte persoonlijkheden uit de Italiaanse renaissance, die schuldig zijn aan de dood van zijn familieleden.
Verlangend naar wraak, begint Ezio aan een eenzame zoektocht om de verantwoordelijken voor deze tragedie te vermoorden.
Een ware Don Juan in hart en nieren, leert Ezio Auditore da Firenze een Schaduwmoordenaar te worden met als doel zijn familie te wreken, verraden door invloedrijke personen uit Italië die hij nu wil uitroeien.
Door Ezio heen word je een echte Meester Schaduwmoordenaar. Deze reis, door steden die tot de schitterendste ter wereld behoren zoals Florence en Venetië, speelt zich af in de 15e eeuw, een tijdperk waarin kunst en cultuur ontstonden tegelijk met corruptie, hebzucht en moord.
Tijdens je avontuur zullen de opdrachten nooit hetzelfde zijn, want je kunt kiezen welke je wilt spelen, wanneer je wilt, binnen een open wereld waarin je vrij kunt rondlopen, zwemmen, paardrijden, varen of zelfs vliegen.
Ontdek een wereld vol leven waarin elk personage zelfstandig handelt en waarmee de speler kan omgaan. Je kunt je nog realistischer mengen in de menigte.
De hulp die je aan andere ontmoetingen biedt, wordt gul beloond en kan soms verrassende gevolgen hebben...