Assassin's Creed 2 est la suite du jeu qui devint la nouvelle licence la plus rapidement vendue de l'histoire du jeu vidéo. Le nouvel héros de la série est Ezio Auditore da Firenze, un jeune noble Italien, évoluant dans une nouvelle époque, la Renaissance.
Ezio se lie d'amitié avec Leonardo da Vinci, affronte les plus puissantes familles de Florence et s'aventure jusque dans les canaux de Venise, où il deviendra un Maître Assassin.
Au XVème siècle, l'Italie était morcelée en Cités-États, comme Venise et Florence, où de grandes familles, puissantes à la fois sur les plans politiques et économiques, commençaient à diriger par elles-mêmes ces régions.
Ce voyage, passant par quelques-unes des plus belles cités du monde, se déroule à une époque de l'Histoire où la culture et l'art se développèrent parmi la corruption, le meurtre et l'avarice.
Vous pourrez remplir vos missions où et quand vous le souhaiterez, dans un univers ouvert qui encourage l'exploration et vous permettra de vous déplacer de nouvelles manières, en nageant et même en volant.
La multiplicité des manières de jouer vous permettra de poursuivre la voie que vous souhaiterez emprunter sans aucune restriction.